Técnicas de Laboratorio

Técnicas de laboratorio

Uno de los aspectos fundamentales en CERAM es la investigación y actualización de las distintas técnicas que se pueden aplicar en los tratamientos de reproducción asistida.

Estas técnicas nos ayudan a mejorar las tasas de éxito, aunque es muy importante estudiar cada caso con detalle para asegurar que la técnica es adecuada y necesaria de cara a conseguir un embarazo.

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A continuación encontrará un detalle de las técnicas que usamos y una descripción indicando en que consiste y cuando se recomienda cada técnica. Si tuviera dudas sobre cualquier técnica no dude en contactarnos por telefono y estaremos encantados de explicarle cómo funciona cada tipo de tratamiento de fertilidad.

ICSI

icsi fertilidad embarazoLa ICSI es la técnica en reproducción asistida más utilizada en la actualidad. En los tratamientos de fecundación in vitro, donación en embriones, donación de óvulos o donación de semen encontraremos que se recomienda utilizar la técnica ICSI ya que aumenta las posibilidades de embarazo.

En el laboratorio se seleccionan los mejores espermatozoides y óvulos y se inyecta uno a uno dentro del óvulo maduro. Los embriones resultantes se colocan en el útero como en una FIV o se vitrifican en el caso de embriones sobrantes.

¿Cuándo se utiliza el ICSI?

  • Número muy bajo de espermatozoides, o casos de movilidad o motilidad alterada.
  • Casos en los que se deba extraer quirúrgicamente espermatozoides del epidídimo (PESA) o del testículo (TESA).
  • En caso de duda acerca de la fertilización por ejemplo, infertilidad sin causa aparente.
  • En casos de mala calidad ovacitaria o en los que hay pocos óvulos.
  • Si la mujer tiene una edad reproductiva avanzada.

Tasa de embarazo de ICSI

Debemos considerar los factores de la edad y el número de embriones transferidos a la hora de hablar de tasas de embarazo. La tasa de embarazo de fecundación in vitro (FIV) con el método de Inyección intra-citoplasmática de espermatozoides (ICSI) en CERAM es aproximadamente un 67%.

IMSI

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CERAM fue uno de los centros pioneros en incorporar el IMSI a su laboratorio. La técnica de fertilidad IMSI (inyección intra-citoplasmática de espermatozoides morfológicamente seleccionados) puede aumentar significativamente la tasa de éxito de embarazo.

En la técnica del IMSI, la muestra de espermatozoides del hombre se examina a través del microscopio que multiplica la imagen de los espermatozoides  hasta 6.000 veces (aunque en ocasiones se pueden aumentar un poco más).

Esto hace que sea posible descartar espermatozoides cuyos núcleos tienen una forma anormal y por tanto, menos probabilidades de producir un embrión sano. Solo los espermatozoides que parecen tener “buenas” características genéticas son seleccionados con el microscopio de IMSI. Estos espermatozoides seleccionados son fertilizados uno a uno en los óvulos a través de la técnica ICSI, aumentando hasta un 15% más la tasa de embarazo.

¿Cuándo se utiliza el IMSI?

  • Casos de aborto de repetición por un factor espermático
  • Si al realizar el seminograma se observa una calidad de espermatozoides baja y se recomienda realizar una selección de espermatozoides
  • En los casos de teratozoospermia o espermatozoides con anomalías morfológicas

MACS

En CERAM somos pioneros en la costa del sol en aplicar la última técnica en reproducción asistida que permite clasificar y separar magnéticamente los espermatozoides.

La fragmentación del DNA se ha convertido en los últimos años un elemento básico para el diagnóstico y una prueba fundamental para explicar causas de infertilidad en las que la muestra de semen parece “normal” en cuanto a movilidad y morfología. Los diversos estudios apuntan a que las causas de fragmentación vienen relacionadas principalmente por una acumulación de especies oxidativas. Actualmente se está trabajando en un tratamiento antioxidante, aunque aún los resultados no han mostrado la efectividad deseada.

Mientras tanto se ha desarrollado una técnica para evitar el problema y aumentar las posibilidades al seleccionar espermatozoides sanos y viables para un tratamiento de ICSI/IMSI.

Reducción de espermatozoides apoptóticos por MACS

La apoptosis es un proceso bioquímico relacionado con niveles elevados de DNA fragmentado. Annexin V reconoce un antígeno (fosfatidilserina exteriorizada, EPS) que se almacena en el plasma de la membrana de las células apoptóticas.

Marcando los espermatozoides apoptóticos con el complejo magnético de Annexin V y utilizando la técnica de clasificación y separación magnética de células activadas (MACS) somos capaces de separar los espermatozoides con apoptosis de aquellos que están sanos.

La técnica de clasificación y separación magnética de células activadas (MACS) empieza marcando las células apoptóticas a través del complejo magnético de Annexin V. Las células marcadas se pasan por una columna separadora colocada en un campo magnético. Aquellas células que no son buenas se quedan en la columna, y los espermatozoides vivos que no han sido marcados por el reactivo pasan por la columna y son recogido para utilizar en el tratamiento (Fig.1).

Los espermatozoides enriquecidos muestran por lo general una calidad mejor en cuanto a morfología, movilidad, fragmentación del DNA, apoptosis, supervivencia y potencial de fertilización.

¿Cuándo se utiliza el MACS?

En un 20% de los casos la infertilidad viene causada por el factor masculino, sin embargo contribuye en otro 30%-40% en factores mixtos diagnosticados.

Cuando existe un factor de infertilidad masculino:

  • Diagnosticado tras un análisis de semen anómalo o irregular
  • En determinadas ocasiones otros factores masculinos como un alto número de espermatozoides con fragmentación en el ADN.

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BIOPSIA TESTICULAR

La biopsia testicular se lleva a cabo en aquellos pacientes que no muestran espermatozoides en el semen eyaculado, ya sea por causa patológica o bien, por haber sido sometidos previamente a una vasectomía. Consiste en extraer quirúrgicamente espermatozoides directamente del testículo. Es una cirugía ambulatoria y se hace con anestesia local y o general.

Conviene resaltar que en la muestra extraída se pueden congelar para ser utilizados en ciclos posteriores, evitando así la repetición de todo el proceso de la aspiración del epidídimo o de la biopsia testicular

¿A quién se aconseja la recuperación de esperma quirúrgica?

Hay determinados grupos de pacientes a los que la recuperación quirúrgica de espermatozoides es recomendable.

  • Ausencia congénita bilateral de conductos deferentes
  • La obstrucción de ambos conductos eyaculadores
  • Azoospermia
  • Vasectomía

¿Cómo se realiza la biopsia testicular?

En determinados casos los espermatozoides pueden necesitar ser quirúrgicamente recogidos en el epidídimo o testículo mediante una de las varias técnicas quirúrgicas de recuperación de espermatozoides (PESA, TESA) dependiendo de la causa de la falta de espermatozoides en el semen.

En CERAM realizamos dos tratamientos para conseguir espermatozoides con una biopsia testicular:

  1. La aspiración percutánea de espermatozoides del epidídimo (PESA)
    Este procedimiento es breve y relativamente sin dolor. Una aguja fina se inserta a través del escroto en el epidídimo y el líquido se obtiene mediante una suave aspiración. Este líquido se analizara el contenido y calidad del esperma en el laboratorio.
  1. Extracción testicular de espermatozoides (TESA)
    Es la recogida de espermatozoides a partir de una biopsia o varias biopsias del tejido testicular realizando después de una pequeña incisión en la piel del escroto.

DGP

El diagnóstico genético pre-implantacional o DGO es una técnica que consiste en obtener embriones mediante fecundación in vitro, y una vez alcanzado el estadio de 8 células, extraer 1 ó 2 células para analizarla mediante técnicas genéticas moleculares.

Del estudio seleccionamos aquellos embriones que son normales para la enfermedad estudiada y por tanto no presentan anomalías cromosómicas o mutaciones genéticas.

¿Cuándo se conseja realizar un DGP?

  • Pacientes con riesgo de transmitir enfermedades genéticas a sus hijos.
  • Mujeres mayores de 38 años, en las cuales existe un incremento de riesgo para gestaciones con anomalías cromosómicas
  • Casos de abortos espontáneos repetidos que no tienen causa aparente.
  • Parejas que han tenido fallos repetidos en procedimientos de FIV o ICSI, por motivos inexplicables. De esta manera, es posible aumentar notablemente las probabilidades de embarazo en estas parejas.

CULTIVO A BLASTOCISTO

Esta técnica se utiliza comúnmente en reproducción asistida tanto en los tratamientos de FIV como ICSI y consiste en prolongar el cultivo de los embriones en el laboratorio hasta el quinto o sexto día y así seleccionar aún mejor los embriones a transferir.

Se recomienda este cultivo siempre y cuando haya un número suficiente de embriones ya que la tasa de embarazo aumenta entre 10% a un 20% al porcentaje normal de transferencia día 3.

¿Cuándo se conseja el cultivo a blastocisto?

  • En casos con antecedentes de fallo implantacional.
  • Cuando existe un número suficiente de embriones tras la fecundación.

HATCHING ASISTIDO

El hatching asistido o eclosión asistida es una técnica que consiste en realizar un pequeño orificio en la zona pelúcida (cápsula que protege y rodea al embrión) con la intención de favorecer su salida y así poder implantarse en el útero.

¿Cuándo se conseja el cultivo a hatching asistido?

  • Fracaso de implantación: Repetidas FIV con transferencia embrionaria pero no embarazo.
  • Mujeres de edad avanzada.
  • Cifras de FSH elevadas.
  • Ovocitos con zona pelúcida engrosada.
  • Embriones de morfología no óptima.
  • Transferencia de embriones congelados.

VITRIFICACIÓN

La técnica de la vitrificación consiste en congelar óvulos o embriones de forma instantánea. Los óvulos o embriones son enfriados bajo condiciones controladas y se sumergen en nitrógeno líquido a bajas temperaturas (-196 ºC) en un tanque para el almacenamiento a largo plazo. Una vez vitrificados, los óvulos o embriones se pueden almacenar de esta manera por muchos años antes de ser descongelados y utilizados en un tratamiento posterior.

A menudo, los tratamientos de fertilidad, como la fecundación in vitro, ICSI y donación de óvulos, generan embriones sobrantes. En el  50% de los casos estos embriones son de una calidad lo suficientemente buena para ser congelados y almacenados para su futuro uso.

El uso de embriones vitrificados es mucho menos invasivo para la mujer que realizar un  nuevo ciclo de FIV. Asimismo, con la congelación de embriones  se puede reducir  el número de nacimientos múltiples y ofrece a las parejas una mayor flexibilidad en su planificación de la familia.

En CERAM  antes de  vitrificar (congelar)  los embriones sobrantes dejamos que estos embriones lleguen al estadio de Blastocistos ya que nos garantiza en un porcentaje muy alto la supervivencia al descongelar estos embriones.

¿Cuándo se conseja la vitrificación de óvulos o embriones?

  • En mujeres que corren un riesgo elevado de desarrollar el síndrome de hiperestimulación ovárica después de la estimulación ovárica en el proceso de  fertilización in vitro (FIV).
  • Cuando la implantación del embrión puede verse comprometida en casos como la presencia de pólipos endometriales, el poco desarrollo del endometrio, cuando hay sangrado el día o en días anteriores a la  transferencia de embriones,  o en enfermedad de la receptora.
  • En casos de mujeres jóvenes entre 20 y 30 años que quieran preservar su fertilidad por decisiones médicas o socio-culturales.